GB/T 22035-2008 乳及乳制品中植物油的检验 气相色谱法 检测标准

1范围

本标准规定了用气相色谱法检验乳及乳制品中植物油的方法。

本标准适用于乳及乳制品中植物油的定性检验。

2.规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-1992,neq ISO 3696:1987)

3.原理

样品经过氢氧化钾乙醇溶液皂化,用乙醚、石油醚萃取脂肪,通过蒸馏或蒸发去除溶剂,用正己烷萃取游离的甾醇,用气相色谱分析。若所测样品中含有β-谷甾醇,则确定其中含有植物油成分。

4.试剂与材料

所有的试剂如未注明规格,均为分析纯;实验用水如未注明,均应符合GB/T 6682的规定。

4.1 正己烷(C5H6):色谱纯。

4.2 乙醇(C2H5OH):95%。

4.3 乙醚[(C2H5)2O]。

4.4 石油醚:沸程为30℃～60℃。

4.5 无水硫酸钠(Na2SO4)。

4.6 氢氧化钾溶液:500g/L。

称取500g氢氧化钾(KOH),溶解后转移至1000mL容量瓶中,定容,混匀。

4.7 胆固醇和β-谷甾醇混和标准溶液:每毫升含各单组分甾醇为0.4mg。

分别精确称取胆固醇和β-谷甾醇标准品10mg,用正己烷(4.1)溶解并定容到同一25mL容量瓶中。摇匀后,冷藏于冰箱中,有效期60d。

5.仪器和设备

实验室常用仪器及以下各项。

5.1 气相色谱仪:配备氢火焰离子化检测器(FID)。

5.2 分析天平(感量0.01g)。

5.3 分析天平(感量0.1mg)。

5.4 旋转蒸发器。

5.5 磨口锥形瓶:250mL,可以连接空气冷凝管。

6.试样制备

6.1 液态试样

称量20g样品,精确至0.01g,置于磨口锥形瓶(5.5)中。

6.2 固态试样

称量1g～5g样品,精确至0.01g,置于磨口锥形瓶(5.5)中,加入50℃温水10mL溶解。

注:根据样品中的脂肪含量调整称取样量,使试样中脂肪含量不低于1g。

7.分析步骤

7.1 试液制备

上述盛有试样(第6章)的磨口锥形瓶(5.5)中,加入25mL氢氧化钾溶液(4.6)及25mL乙醇(4.2),摇匀,加入4粒～5粒玻璃珠,装上冷凝管,85℃水浴回流皂化45min。皂化液冷却至室温后,转入250mL分液漏斗中,用少量水洗锥形瓶(5.5),洗液并入皂化液中。

分液漏斗中加入25mL乙醚(4.3)和25mL石油醚(4.4),轻轻振摇约1min,静止分层。水相再用25mL乙醚(4.3)分别萃取两次,合并萃取液。多次用25mL水洗萃取液至pH为中性,经无水硫酸钠(4.5)脱水,过滤,收集滤液于蒸馏瓶中。40℃左右,用旋转蒸发器(5.4)将萃取液蒸至近干,用正己烷(4.1)溶解残渣,转移定容至10mL,用于气相色谱仪(5.1)测定。

7.2 气相色谱參考条件

气相色谱柱:DB-5毛细管柱,30m×0.25mm×0.25μm;

检测器温度:325℃;

进样口温度:280℃;

柱温:程序升温,自200℃起,以15℃/min升温至300℃,保持20min;

氮气流速:1.0mL/min;

氢气流速:30mL/min;

空气流速:300mL/min;

分流比:5:1;

进样量:2μL。

7.3 测定

准确吸取2μL胆固醇和β-谷甾醇的混合标准工作液(4.7),注入气相色谱仪(5.1)。在上述色谱条件下,出峰顺序依次为胆固醇和β-谷甾醇,标准溶液的气相色谱图参见图A.1。

准确吸取不少于两份的2μL试液(7.1),分别注入气相色谱仪(5.1)。

8.结果表述

胆固醇为动物脂肪的特征组分。若色谱图中出现β-谷甾醇色谱峰,则表明所测试样中含有植物油成分。

9.灵敏度

样品中脂肪的胆固醇检出限为0.5mg/kg,β-谷甾醇的检出限为1mg/kg。

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